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豬ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平

釋出時間✘•│╃: 2022-05-28  點選次數✘•│╃: 235次
  豬ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平☁··。用純化的待測物質抗體包被微孔板•╃↟↟,製成固相抗體•╃↟↟,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質•╃↟↟,再與HRP標記的待測物質抗體結合•╃↟↟,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物•╃↟↟,經過*洗滌後加底物TMB顯色☁··。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色•╃↟↟,並在酸的作用下轉化成最終的黃色☁··。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關☁··。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值)•╃↟↟,透過標準曲線計算樣品中待測物質濃度☁··。
 
  豬ELISA試劑盒的組成✘•│╃:
  1₪↟、結合物及標本的稀釋液☁··。
  2₪↟、洗滌液•╃↟↟,在板式ELISA中•╃↟↟,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩衝鹽水☁··。
  3₪↟、酶標記的抗原或抗體(結合物)☁··。
  4₪↟、酶的底物☁··。
  5₪↟、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)•╃↟↟,elisa試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中)☁··。
  6₪↟、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)☁··。
 
  標本要求✘•│╃:
  1₪↟、標本採集後儘早進行提取•╃↟↟,提取按相關文獻進行•╃↟↟,提取後應儘快進行實驗☁··。若不能馬上進行試驗•╃↟↟,可將標本放於-20℃儲存•╃↟↟,但應避免反覆凍融☁··。
  2₪↟、不能檢測含NaN3的樣品•╃↟↟,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性☁··。
 
  豬ELISA試劑盒的注意事項✘•│╃:
  1₪↟、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用•╃↟↟,酶標包被板開封后如未用完•╃↟↟,板條應裝入密封袋中儲存☁··。
  2₪↟、濃洗滌液可能會有結晶析出•╃↟↟,稀釋時可在水浴中加溫助溶•╃↟↟,洗滌時不影響結果☁··。
  3₪↟、各步加樣均應使用加樣器•╃↟↟,並經常校對其準確性•╃↟↟,以避免試驗誤差☁··。一次加樣時間最好控制在5分鐘內•╃↟↟,如標本數量多•╃↟↟,推薦使用排槍加樣☁··。
  4₪↟、請每次測定的同時做標準曲線•╃↟↟,最好做復孔☁··。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔第一孔的OD值)•╃↟↟,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)後再測定•╃↟↟,計算時請最後乘以總稀釋倍數(×n×5)☁··。
  5₪↟、封板膜只限一次性使用•╃↟↟,以避免交叉汙染☁··。
  6₪↟、底物請避光儲存☁··。
  7₪↟、嚴格按照說明書的操作進行•╃↟↟,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準☁··。
  8₪↟、所有樣品•╃↟↟,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理☁··。
  9₪↟、本試劑不同批號組分不得混用☁··。
  10₪↟、如與英文說明書有異•╃↟↟,以英文說明書為準☁··。
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