分享₪•·☁╃！小鼠白介素ELISA試劑盒的實驗操作步驟

　　小鼠白介素ELISA試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）✘☁。往預先包被小鼠白介素捕獲抗體的包被微孔中·☁，依次加入標本▩☁•、標準品▩☁•、HRP標記的檢測抗體·☁，經過溫育並洗滌✘☁。用底物TMB顯色·☁，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色·☁，並在酸的作用下轉化成最終的黃色✘☁。顏色的深淺和樣品中的小鼠呈正相關✘☁。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）·☁，計算樣品濃度✘☁。

 

　　它的五大優點▩✘◕↟：

　　1▩☁•、適用血清▩☁•、血漿▩☁•、組織勻漿液▩☁•、細胞培養上清液▩☁•、尿液等等多種標本型別；

　　2▩☁•、吸附效能好·☁，空白值低✘☁。孔底透明度高的固相載體；

　　3▩☁•、穩定的重複性和可靠；

　　4▩☁•、高效▩☁•、靈敏▩☁•、特異的抗體；

　　5▩☁•、較大限度的節省實驗經費✘☁。

 

　　小鼠白介素ELISA試劑盒的實驗操作步驟▩✘◕↟：

　　1▩☁•、把試劑混勻·☁，切記實驗時不要加理大量含有泡沫的液體·☁，避免實驗產生誤差✘☁。

　　2▩☁•、跟資料測樣決定板條數✘☁。每個標準品和空白孔建議做復孔✘☁。每個樣品根據自己的數量來定·☁，能使用復孔的儘量做復孔✘☁。

　　3▩☁•、加入稀釋好後的標準品50ul於反應孔 加入待測樣品50ul於反應孔內✘☁。立即加入50ul的生物素標記的抗體✘☁。蓋上膜板·☁，輕輕振盪混勻·☁，37℃溫育1小時✘☁。

　　4▩☁•、甩去孔內液體·☁，每孔加滿洗滌液·☁，振盪30秒·☁，甩去洗滌液·☁，用吸水紙拍幹✘☁。重複此操作3次✘☁。如果用洗板機洗滌·☁，洗滌次數增加一次✘☁。

　　5▩☁•、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP·☁，輕輕振盪混勻·☁，37℃溫育30分鐘✘☁。

　　6▩☁•、甩去孔內液體·☁，每孔加滿洗滌液·☁，振盪30秒·☁，甩去洗滌液·☁，用吸水紙拍幹✘☁。重複此操作3次✘☁。如果用洗板機洗滌·☁，洗滌次數增加一次✘☁。

　　7▩☁•、每孔加入底物各50ul·☁，輕輕振盪混勻·☁，37℃溫育10分鐘✘☁。一定要避免光照✘☁。

　　8▩☁•、取出酶標板·☁，迅速加入50ul終止液·☁，加入終止液後應立即測定結果✘☁。

　　9▩☁•、在450nm波長處測定各孔的OD值✘☁。