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關於鹿ELISA試劑盒的操作過程│▩₪,主要分以下7個步驟

釋出時間✘▩◕│◕: 2022-04-25  點選次數✘▩◕│◕: 405次
  鹿ELISA試劑盒採用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)·│◕│✘。將標準品₪◕、待測樣本加入到預先包被牛血清白蛋白(BSA)透明酶標包被板中│▩₪,溫育足夠時間後│▩₪,洗滌除去未結合的成分│▩₪,再加入酶標工作液│▩₪,溫育足夠時間後│▩₪,洗滌除去未結合的成分·│◕│✘。依次加入底物A₪◕、B│▩₪,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物│▩₪,在酸的作用下變成黃色│▩₪,顏色的深淺與樣品中牛血清白蛋白(BSA)濃度呈正相關│▩₪,450nm波長下測定OD值│▩₪,根據標準品和樣品的OD值│▩₪,計算樣本中牛血清白蛋白(BSA)含量·│◕│✘。
 

 

  鹿ELISA試劑盒的準確性✘▩◕│◕:
  溫育✘▩◕│◕:加入試劑的順序應一致│▩₪,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣·│◕│✘。按照說明書中標明的時間₪◕、加液的量及順序進行溫育操作·│◕│✘。
  顯色✘▩◕│◕:一定要控制時間│▩₪,根據試劑盒說明操作即可·│◕│✘。一般來說│▩₪,顯色時間過短│▩₪,結果偏低;顯色時間過長│▩₪,空白增高或者非特異性顯色增加·│◕│✘。反應時間的控制✘▩◕│◕:加入底物後請定時觀察反應孔的顏色變化│▩₪,如果顏色較深│▩₪,請提前加入終止液終止反應·│◕│✘。用離心收集在真空血液收集管中的血液│▩₪,分離血漿樣品│▩₪,然後儲存在零下80℃直到使用·│◕│✘。以避免血漿中的干擾物質影響檢測│▩₪,按照說明書方法檢測·│◕│✘。建議實驗前預測樣品含量│▩₪,如樣品濃度過高│▩₪,應對樣品進行稀釋│▩₪,計算結果時乘以相應的稀釋倍數·│◕│✘。
 
  鹿ELISA試劑盒操作過程主要步驟總結如下✘▩◕│◕:
  稀釋--加樣--溫育--配液--洗滌--加酶--溫育--洗滌--顯色--終止--測定
  詳細操作步驟如下✘▩◕│◕:
  1₪◕、從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條│▩₪,剩餘板條用自封袋密封放回4℃;
  2₪◕、設定標準品孔和樣本孔│▩₪,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3₪◕、樣本孔先加待測樣本10μL│▩₪,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
  4₪◕、除空白孔外│▩₪,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL│▩₪,用封板膜封住反應孔│▩₪,37℃水浴鍋或恆溫箱溫育60min;
  5₪◕、棄去液體│▩₪,吸水紙上拍幹│▩₪,每孔加滿洗滌液│▩₪,靜置1min│▩₪,甩去洗滌液│▩₪,吸水紙上拍幹│▩₪,如此重複洗板5次;
  6₪◕、每孔加入底物A₪◕、B各50μL│▩₪,37℃避光孵育15min;
  7₪◕、每孔加入終止液50μL│▩₪,15min內│▩₪,在450nm波長處測定各孔的OD值·│◕│✘。
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